將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出，置于室溫平衡30min以上,洗滌液冷藏時可能會有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解，每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架，將不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。

　　實驗開始前，用去離子水將20×濃縮洗滌液按20倍稀釋成工作洗滌液。

　　編號：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號，每個樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。

　　加樣反應(yīng)：加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50?l/孔到各自的微孔中，然后加酶標(biāo)記物50?l/孔，再加入50?l/孔的抗體工作液，用蓋板膜封板，輕輕振蕩5秒混勻，25℃反應(yīng)30分鐘。

　　洗滌：小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用工作洗滌液250?l/孔充分洗滌5次，每次間隔30秒，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。

　　顯色：每孔加入底物液A50?l，再加底物液B50?l，輕輕振蕩5秒混勻，25℃避光顯色15分鐘。

　　終止：每孔加入終止液50?l，輕輕振蕩混勻，終止反應(yīng)。

　　測吸光值：用酶標(biāo)儀于450nm處測定每孔吸光度值（建議用雙波長450/630nm）。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。

　　呋喃唑酮快速檢測試劑盒結(jié)果分析

　　百分吸光率的計算

　　標(biāo)準(zhǔn)液或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)液或樣本的百分吸光度值的平均值（雙孔）除以個標(biāo)準(zhǔn)液（0ppb）的吸光度值，再乘以100%，即所得

　　呋喃唑酮快速檢測試劑盒注意事項

　　1.室溫低于25℃或試劑及樣本沒有回到室溫（25℃）會導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。

　　2.在所有孵育過程中，用蓋板膜封住微孔板，避免光線照射。

　　3.混合要均勻，洗板要*，在ELISA分析中的再現(xiàn)性，很大程度上取決于洗板的一致性。

　　4.在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

　　5.顯色液若有任何顏色表明變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值小于0.5個單位（A450nm< 0.5 ）時，表示試劑可能變質(zhì)。

　　6.不要使用過了有效期的試劑盒，不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。

　　7.反應(yīng)終止液有腐蝕性，避免接觸皮膚。